Humaner HIF-1α (Hypoxie-induzierbarer Faktor 1 Alpha) ELISA-Kit

HAUPTMERKMALE

Vollständiger Name	Hypoxie-induzierbarer Faktor 1 Alpha
Synonym	HIF1A;HIF-1A;MOP1;PASD8;bHLHe78;basic helix-loop-helix transcription factor;
Testtyp	Sandwich
Reaktivität	Menschlich
Messbereich	62.5-4000pg/mL
Empfindlichkeit	37.5pg/mL
Probenart	Serum, Plasma und andere biologische Flüssigkeiten
Probenvolumen	100μL
Nachweiswellenlänge	OD450
Transporttemperatur	2-8°C
Spezifität	Das Kit wies humanes HIF-1α in den Proben nach, und es wurden keine signifikanten Kreuzreaktionen festgestellt.
Mikrotiterplatte	96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip

TESTPRINZIP

Dieses ELISA-Kit basiert auf dem Sandwich-ELISA-Prinzip. Die im Kit enthaltene Mikro-ELISA-Platte ist mit einem spezifischen Antikörper gegen humanes HIF-1α vorbeschichtet. Standards oder Proben werden in die Vertiefungen der Mikro-ELISA-Platte pipettiert und mit dem spezifischen Antikörper inkubiert. Anschließend werden nacheinander ein biotinylierter, spezifischer Detektionsantikörper gegen humanes HIF-1α und ein Avidin-Meerrettichperoxidase (HRP)-Konjugat zu jeder Vertiefung gegeben und inkubiert. Nicht gebundene Komponenten werden abgewaschen. Die Substratlösung wird in jede Vertiefung gegeben. Nur die Vertiefungen, die humanes HIF-1α, den biotinylierten Detektionsantikörper und das Avidin-HRP-Konjugat enthalten, färben sich blau. Die Enzym-Substrat-Reaktion wird durch Zugabe der Stopplösung beendet, wodurch sich die Farbe gelb färbt. Die optische Dichte (OD) wird spektrophotometrisch bei einer Wellenlänge von 450 nm ± 2 nm gemessen. Der OD-Wert ist proportional zur Konzentration von humanem HIF-1α. Die Konzentration von humanem HIF-1α in den Proben kann durch Vergleich der OD-Werte der Proben mit der Standardkurve berechnet werden.

ELISA-KIT KOMPONENTEN

Bei Erhalt sofort auspacken und wie in den Anweisungen empfohlen lagern.

Komponenten	Spezifikationen	Lagerung und Hinweise
Mikrotiterplatte	96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips	Ungeöffnet: -20°C, 12 Monate Nicht verwendet: Zurück in die Aluminiumfolienbeutel geben und verschließen, bei -20°C lagern.
Referenzstandard	96T: 2 vials 48T: 1 vial	Ungeöffnet: -20°C, 12 Monate Bitte verwenden Sie für jedes Experiment frisch gelöste Standards. Verwerfen Sie nicht verwendete Standards nach dem Lösen.
Biotinylierter Nachweis-Antikörper-Konzentrat (100×)	96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial	Ungeöffnet: -20°C, 12 Monate Nicht verwendet: Bitte das Konzentrat verschließen und bei -20°C lagern, die Arbeitslösung verwerfen.
HRP-Konjugat-Konzentrat (100×)	96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial	Ungeöffnet: -20°C (Lichtschutz), 12 Monate Nicht verwendet: Bitte das Konzentrat verschließen und bei -20°C lagern, die Arbeitslösung verwerfen.
Biotinylierter Nachweis-Antikörper-Verdünner	14mL×1	2-8℃, 12 Monate
HRP-Konjugat-Verdünner	14mL×1	2-8℃, 12 Monate
Referenzstandard- und Probenverdünner	20mL×1	2-8℃, 12 Monate
Waschpuffer-Konzentrat (25×)	30mL×1	2-8℃, 12 Monate
Substratreagenz (TMB)	10mL×1	2-8°C (Lichtschutz), 12 Monate
Stopplösung	7mL×1	2-8°C/Zimmertemperatur

TESTVERFAHREN

TYPISCHE DATEN

Menschlich HIF-1α ELISA-Standardkurve

Typische Daten dienen nur als Referenz und Kurven sollten für jedes Experiment neu aufgezeichnet werden. Für die Anpassung wird die Logistikfunktion empfohlen.

PRÄZISION

Intra-Test-Präzision (Präzision innerhalb eines Tests): Drei Proben mit bekannter Konzentration wurden zwanzigmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Test-Präzision zu bewerten.

Inter-Test-Präzision (Präzision zwischen Tests): Drei Proben mit bekannter Konzentration wurden in zwanzig separaten Tests getestet, um die Inter-Test-Präzision zu bewerten. Die Tests wurden von mindestens drei Technikern unter Verwendung von zwei Chargen von Komponenten durchgeführt.

	Intra-Test-Präzision			Inter-Test-Präzision
Probe	1	2	3	1	2	3
n	20	20	20	20	20	20
Mittelwert (pg/mL)	220.27	512.73	1511.71	202.89	474.45	1444.98
Standardabweichung	14.93	29.28	65.91	10.49	26.47	62.13
CV(%)	6.78	5.71	4.36	5.17	5.58	4.3

RÜCKGEWINNUNG

Die Rückgewinnung von Menschlich HIF-1α, das in Proben in drei verschiedenen Konzentrationen in verschiedenen Matrizes über den gesamten Messbereich des Tests zugesetzt wurde, wurde evaluiert.

Probenart	Bereich (%)	Durchschnittliche Rückgewinnung (%)
Serum(n=8)	91-103	97
EDTA-Plasma (n=8)	87-102	95
Zellkulturmedium (n=8)	88-101	94

LINEARITÄT

Um die Linearität des Tests zu beurteilen, wurden Proben, die hohe Konzentrationen von Menschlich HIF-1α in verschiedenen Matrizes enthielten und/oder mit diesen versetzt waren, mit dem Referenzstandard- und Probenverdünner verdünnt, um Proben mit Werten im dynamischen Messbereich des Tests zu erhalten.

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