EnkiLife TSA Multiple Fluorescent Staining Kit
Das EnkiLife TSA Mehrkanal-Färberekit (Multiple Fluorescent Staining Kit) ist optimiert für Multiplex-Immunofluoreszenz (IF) an Formalin-fixierten Paraffineingebetteten (FFPE)-Schnitten, Gefrierschnitten, kultivierten Zellen (adhäsive oder Streupräparate) und Organoidmodellen.
Das Workflow wird durch Tyramid-Signalverstärkung (TSA) angetrieben. Harnrasen-Peroxidase (HRP) katalysiert die Umwandlung von H₂O₂ in hochreaktive Sauerstoffradikale, die Fluorophore-verbundene Tyramide kovalent mit elektronenreichen Aminosäureresten (Trp, His, Tyr) in unmittelbarer Nähe des Antigen-Antikörper-Komplexes koppeln.
Jedes Tyramid ist mit einem spektral unterscheidbaren, photostabilen Fluorophor markiert, was iterative Zyklen der Antikörperbindung, HRP-vermittelte Verstärkung und Fluorophor-Deposition ermöglicht.
Produktvorteile
7-Kanal-Signale von einem einzigen Objektträger
7 spektral aufgelöste TSA-Fluorophore (480-750 nm) für jedes experimentelle Panel
Flexible Antikörperauswahl
Kompatibel mit Primärantikörpern aus Kaninchen und Maus
Breite Anwendungsgebiete
Funktioniert mit FFPE-Schnitten, Gefrierschnitten, Zellen und Organoiden
All-in-One-Komponenten
Vollständiges Kit mit Tyramiden, Puffern, Reagenzien und Deckmedium
Gentile Antikörperelution
Spezial-Puffer entfernt Antikörper, während Antigene und Gewebeintegrität erhalten bleiben
TSA Mehrkanal-Färberekits
| Kat.# | Größe | Produktname |
|---|---|---|
| RA10008 | 20T, 50T, 100T | 3-Kanal-Mehrfachfluoreszenzfärberekit (mIHC) |
| RA10009 | 20T, 50T, 100T | 4-Kanal-Mehrfachfluoreszenzfärberekit (mIHC) |
| RA10010 | 20T, 50T, 100T | 5-Kanal-Mehrfachfluoreszenzfärberekit (mIHC) |
| RA10011 | 20T, 50T, 100T | 6-Kanal-Mehrfachfluoreszenzfärberekit (mIHC) |
| RA10012 | 20T, 50T, 100T | 7-Kanal-Mehrfachfluoreszenzfärberekit (mIHC) |
7-Kanal-Mehrfachfluoreszenzfärberekit (mIHC)
Komponenten und Verdünnungen
| Komponenten | TSA-CY3 | TSA-FITC | TSA-680 | TSA-430 | TSA-594 | TSA-CY7 | TSA Verdünnungspuffer | 3% H₂O₂ |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Verdünnungen | 1:200 | 1:200 | 1:200 | 1:200 | 1:200 | 1:200 | Bereit zur Anwendung | Bereit zur Anwendung |
| Komponenten | Blockierungslösung | Primärantikörper-Verdünnungspuffer | Antikörper-Elutionsreagenz | HRP-Ziege anti-Kaninchen/Maus IgG | DAPI-Färbung | Anti-fluoreszenz-Ausbleichungs-Deckmedium |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Verdünnungen | Bereit zur Anwendung | Bereit zur Anwendung | Bereit zur Anwendung | Bereit zur Anwendung | Bereit zur Anwendung |
Demonstrationsbilder
Testprobe: Ratte-Niere
AQP4: Positive Färbung ist in Hauptzellen der inneren Medulla-Sammelgänge sowie in kortikalen und äußeren Medulla-Sammelgängen nachweisbar.
CD31: Weit verbreitet zur Markierung von Gefäßendothel; exprimiert im glomerulären Kapillarendothel und Gefäße auf allen hierarchischen Ebenen.
TGFβ1: Expression ist in Hypertonie- und Fibrosemodellen deutlich hochreguliert; nachgewiesen in glomerulären Epithelzellen (hauptsächlich Podozyten) und interstitiellen Fibroblasten.
Zo-1: Als Gerüstprotein der Tight Junctions bewahrt es die glomeruläre Filtrationsbarriere und die tubuläre Epithelpolarität.
Kollagen I: In fibrotischen oder sklerotischen Modellen sammelt es sich extensiv im Interstitium und in den Glomeruli an.
| Ziel | Fluorescein/Markierung | Anregung (Ex, nm) | Emission (Em, nm) | Filter | Bildfarbe |
|---|---|---|---|---|---|
| AQP4 | TSA-430 | 430nm | 480nm | Aqua-Kanal | Gelb |
| CD31 | TSA-FITC | 490nm | 520nm | FITC-Kanal | Grün |
| TGFβ1 | TSA-CY3 | 550nm | 570nm | CY3-Kanal | Rot |
| Zo-1 | TSA-594 | 590nm | 620nm | Rot-Kanal | Cyan |
| Kollagen I | TSA-680 | 680nm | 700nm | CY5/CY5.5 Kanal | Lila |