DNA-Schädigung
Die Ataxia-telangiectasia-mutierten Kinasen (ATM) und die verwandten Ataxia-telangiectasia-und-Rad3-verwandten Kinasen (ATR) gehören zur PI3-Kinase-artigen Kinase-Familie (PIKK). Sie phosphorylieren mehrere Substrate an Serin- oder Threoninresten, die von einer Glutamin gefolgt werden, in Reaktion auf DNA-Schäden oder Replikationsblockaden (1-3). p53 wird durch ATM, ATR und DNA-PK bei Ser15 phosphoryliert. Diese Phosphorylierung beeinträchtigt die Fähigkeit von MDM2, an p53 zu binden, und fördert sowohl die Akkumulation als auch die Aktivierung von p53 in Reaktion auf DNA-Schäden (4,5). Chk1 und Chk2, downstream-kinetische Proteinkinasen von ATM/ATR, spielen eine wichtige Rolle bei der Kontrolle des DNA-Schaden-Checkpoint-Kontrollmechanismus, der embryonalen Entwicklung und der Tumorsuppression (6). Chk1 wird nach DNA-Schädigung bei Ser280 und Ser296 phosphoryliert. Das aminoterminale Domänen von Chk2 enthält eine Reihe von sieben Serin- oder Threoninresten, einschließlich Thr68, jeweils gefolgt von Glutamin (SQ- oder TQ-Motiv). Nach DNA-Schädigung durch ionisierende Strahlung (IR), UV-Bestrahlung oder Hydroxyurea-Behandlung werden Thr68 und andere Stellen in diesem Bereich durch ATM/ATR phosphoryliert (7-9). Die Brustkrebs-Empfindlichkeit-Proteine BRCA1 und BRCA2 werden häufig bei hereditären Brust- und Eierstockkrebsfällen mutiert und spielen Rollen in mehreren Prozessen, die mit DNA-Schäden, Reparatur, Zellzyklusprogression, Transkription, Ubiquitinierung und Apoptose verbunden sind. Zahlreiche durch DNA-Schäden induzierte Phosphorylierungsstellen auf BRCA1 wurden identifiziert, darunter Serin 1524, sowie Kinasen, die zyklusspezifisch aktiviert werden, einschließlich Aurora A und CDK2, können auch BRCA1 phosphorylieren. IR, DNA- und radiometrisch induzierte DNA-Schäden führen zudem zu einer schnellen Phosphorylierung des Histons H2A.X-Mitglieds H2A.X bei Ser139 durch ATM (10,11). Innerhalb weniger Minuten nach DNA-Schädigung lokalisiert das Serin-139-phosphorylierte H2A.X an den Stellen der DNA-Schäden in Subnuclearen Foki (12).
DNA-Schadens-Reparaturwege. Basen-Ausbeiß-Reparatur (BER), Einzelstrangbruch-Reparatur (SSBR), Nukleotid-Ausschnitt-Reparatur (NER), Fehlanpassungs-Reparatur (MMR), homologe Rekombinations-Reparatur (HRR), nicht-homologes Endjoining (NHEJ), Translesions-Synthese (TLS), Fanconi-Anämie (FA) und Methylguanin-Methyltransferase (MGMT) werden dargestellt.
Relevante Antikörper
| Katalognummer | Produktname | Anwendung | Reaktivität |
|---|---|---|---|
| APRab04285 | ATR (Phospho Ser428) Kaninchen-Polyklonales Antikörper | IHC-P, IF-P, IF-F, ICC/IF, ELISA | Mensch, Ratte, Maus |
| APRab04332 | BRCA1 (Phospho Ser1524) Kaninchen-Polyklonales Antikörper | WB, IHC-P, IF-P, IF-F, ICC/IF, ELISA | Mensch, Ratte, Maus |
| AMRe21000 | Chk2 (Phospho Thr68) Kaninchen-Monoklonaler Antikörper | WB, IF, IP, ELISA | Mensch, Maus, Ratte |
| APRab04456 | Chk1 (Phospho Ser345) Kaninchen-Polyklonales Antikörper | IHC-P, IF-P, IF-F, ICC/IF, ELISA | Mensch, Maus, Ratte |
| AMRe21478 | Histon H2A.X (Phospho Ser139) Kaninchen-Monoklonaler Antikörper | WB, IHC, IF, IP, ELISA | Mensch, Maus, Ratte |
| APRab00821 | Phospho-p53 (Ser15) Kaninchen-Polyklonales Antikörper | WB, IHC-F, IHC-P, ICC/IF, IP, ELISA | Mensch, Ratte |
| AMRe05856 | Phospho-ATM (S1981) (3F17) Kaninchen-Monoklonaler Antikörper | WB, IHC-P, FC, IP, IF-P | Mensch |
| APS0635 | HRP-verknüpftes Polyklonales Ziege Anti-Kaninchen IgG(H+L) Sekundäres Antikörper | ELISA, WB, Dotblot | Maus |
| AMRe80004 | GAPDH (12R9) Kaninchen-Monoklonaler Antikörper | WB, ELISA | Mensch, Maus, Ratte, Kaninchen, Hund, Affe |
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Referenzen
- Kastan, M.B. und Lim, D.S. (2000) Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 1, 179-186.
- Abraham, R.T. DNA-Reparatur (Amst) 3, 883-887.
- Shechter, D. et al. DNA-Reparatur (Amst) 3, 901-908.
- Shieh, S.Y. et al. (1997) Cell 91, 325-334.
- Tibbetts, R.S. et al. (1999) Genes Dev. 13, 152-157.
- Martinho, R.G. et al. (1998) EMBO J. 17, 7239-17249.
- Matsuoka, S. et al. (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97, 10389-10394.
- Melchionna, R. et al. (2000) Nat. Cell Biol. 2, 762-765.
- Ahn, J.Y. et al. (2000) Cancer Res. 60, 5934-5936.
- Rogakou, E.P. et al. (1998) J. Biol. Chem. 273, 5858-5868.
- Burma, S. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276, 42462-42467.
- Rogakou, E.P. et al. (1999) J. Cell Biol. 146, 905-916.
